هنگام انتخاب میکروسکوپ مناسب برای سیستم تصویربرداری سلول زنده چه نکاتی را باید در نظر گرفت

برای انجام موفقیت آمیز آزمایشات تصویربرداری سلول زنده، استفاده از رویکرد مناسب بسیار مهم است. هنگام انتخاب یک میکروسکوپ مناسب برای تصویربرداری سلول زنده، جنبه های زیر باید در نظر گرفته شود: زنده بودن نمونه، سرعت گرفتن تصویر (رزولوشن زمانی) و وضوح مورد نیاز در هر سه بعد.

During live cell imaging, certain environmental conditions must be maintained to avoid detrimental physiological changes. In order to capture physiologically relevant cellular dynamics, live cell experiments require specific environmental conditions, including temperature, pH (via CO2), and humidity control. Furthermore, some experiments may even require hypoxic conditions. Modern incubation systems not only tightly control environmental conditions, they can also provide detailed data reports and alert users to temperature, gas, or humidity variations during the course of an imaging experiment. To minimize or avoid the effects of photodamage, getting the right balance between sensitive detection, accurate label separation (if using >1 برچسب) و کمترین دوز نور برای تحریک بسیار مهم است.

برای آزمایشات سلول زنده، اکتساب با سرعت بالا اغلب حیاتی است، به ویژه برای مطالعه فرآیندهای دینامیکی سریع مانند مشاهده وزیکول. استفاده از فیلترهای نوری به دلیل نیاز به تصویربرداری متوالی هنگام تغییر مجموعه فیلترها برای هر رنگ که برای مطالعه برهمکنش چند مؤلفه استفاده می شود، منجر به محدودیت سرعت می شود. جمع‌آوری متوالی تصاویر به زمان بیشتری نسبت به جمع‌آوری همزمان تصویر نیاز دارد و در نتیجه، حرکات سریع نمونه را می‌توان در حین جمع‌آوری از دست داد، زیرا هر رنگ فاصله زمانی طولانی‌تری از یک تصویر به تصویر دیگر دارد. زمانی که مقایسه مستقیم بین دو یا چند رنگ ضروری است، ممکن است سیگنال‌ها حتی بین جذب فردی فلوروفورها حرکت کرده باشند که تفسیر داده‌ها را پیچیده می‌کند.

چندین فناوری برای به دست آوردن تصاویر در 3 بعدی در طول زمان در دسترس هستند. انتخاب سیستم به آزمایش شما بستگی دارد و اینکه آیا سرعت بالاتر یا نور کمتر نمونه در طول تصویربرداری اولویت شما در هنگام دستیابی به وضوح 3 بعدی مورد نظر است. انتخاب مناسب ترین سیستم به طور سنتی شما را ملزم به انتخاب بین سیستم تصویربرداری سلول زنده مبتنی بر دوربین یا کانونی می کند، با این حال راه حل های مدرن می توانند هر دو حالت را به صورت یکپارچه ارائه دهند.